Nghiên cứu trước đây đã chỉ ra rằng chuột BALB/c, một dòng nhạy cảm với mô hình gây ung thư da bằng 9,10-dimethylbenz(a)anthracene (DMBA) và 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA), cho thấy sự thiếu hụt sPLA2-IID (biểu hiện ở tế bào đuôi gai bạch huyết và đại thực bào M2) làm tăng cường khả năng miễn dịch chống khối u thông qua giảm huy động axit béo ω3. Đồng thời, việc thiếu sPLA2-IIF (biểu hiện ở tế bào sừng biểu bì) làm suy yếu sự tăng sinh quá mức của tế bào sừng thông qua giảm huy động một lysophospholipid đặc hiệu, từ đó ngăn ngừa ung thư da. Nghiên cứu cũng nhận thấy sự phát triển ung thư da ít rõ rệt hơn ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+.
Số lượng và tỷ lệ khối u phát triển theo thời gian ở chuột Pla2g2a–/– bị chậm so với chuột Pla2g2a+/+, mặc dù thể tích khối u, một khi đã phát triển, là tương đương giữa các kiểu gen. Những kết quả này cho thấy sự thiếu hụt sPLA2-IIA ngăn ngừa sự khởi phát, chứ không phải sự tiến triển, của ung thư da.
Phân tích qPCR trên da cho thấy biểu hiện của Cd11c (một dấu hiệu cho đại thực bào M1 và tế bào đuôi gai) giảm ở chuột Pla2g2a–/– được điều trị bằng DMBA/TPA so với chuột Pla2g2a+/+. Phân tích tế bào dòng chảy cũng chứng minh sự giảm đáng kể của đại thực bào giống M1 (F4/80+CD11chiCD206lo) và xu hướng giảm đại thực bào giống M2 (F4/80+CD11cloCD206hi) trên da chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+. Mức biểu hiện của Cd8 (một dấu hiệu tế bào T gây độc tế bào) và Foxp3 (một dấu hiệu Treg) tăng lên trong da được điều trị bằng DMBA/TPA so với da đối chứng của chuột Pla2g2a+/+, trong khi những phản ứng này chỉ ở mức khiêm tốn ở chuột Pla2g2a–/–. Biểu hiện trên da của các cytokine tiền viêm (Il1b và Il6) cũng cho thấy một xu hướng tương tự. Biểu hiện của Il13, được báo cáo là biểu hiện ở tế bào T Vγ5Vδ1+ trong biểu bì và bảo vệ chống lại ung thư da, tăng lên ở da chuột Pla2g2a–/– được điều trị bằng DMBA/TPA so với chuột Pla2g2a+/+, điều này có thể giải thích, ít nhất một phần, cho sự cải thiện ung thư da do xóa sPLA2-IIA. Trong khi điều trị bằng DMBA/TPA làm tăng số lượng tế bào mast ở da – ảnh hưởng đến ung thư da do DMBA/TPA gây ra – ở cả hai kiểu gen một cách tương đương, thì số lượng tế bào mast bị khử hạt ít hơn đáng kể ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+. Như vậy, sự thiếu hụt sPLA2-IIA ở chuột BALB/c làm suy yếu ung thư da, với những thay đổi ở cả hai nhánh viêm và điều hòa của phản ứng miễn dịch trong da được điều trị bằng DMBA/TPA.
Biểu hiện sPLA2-IIA ở ruột được điều chỉnh bởi hệ vi sinh vật đường ruột. Các nghiên cứu khác cho thấy chuột Tg sPLA2-IIA đặc hiệu cho da (K14-Pla2g2aTGN) cho thấy sự gia tăng ung thư da, và việc giảm PLA2G2A trong tế bào ung thư biểu mô vảy da ở người làm giảm khả năng sinh khối u. Tuy nhiên, ngoài những tác động nội tại của sPLA2-IIA trên da ở chuột Tg và người, phát hiện hiện tại cho thấy chuột Pla2g2a–/– biểu hiện kiểu hình da là đáng ngạc nhiên, vì đã có báo cáo rằng sPLA2-IIA được biểu hiện gần như độc quyền ở tế bào Paneth trong ruột non của chuột BALB/c. Thật vậy, nghiên cứu đã xác nhận rằng Pla2g2a được biểu hiện dồi dào ở ruột non (hỗng tràng = hồi tràng > tá tràng) và ở mức độ thấp hơn ở ruột già (đại tràng xuống > đại tràng lên = manh tràng > trực tràng) của chuột BALB/c. Mức biểu hiện của Pla2g2a ở các mô khác so với ruột non và ruột già là gần như không đáng kể, chỉ với biểu hiện dấu vết được phát hiện ở một số mô. Pla2g2a hầu như không thể phát hiện được trên da và chỉ có ở mức dấu vết trong tế bào máu từ chuột Pla2g2a+/+, nhưng không phải chuột Pla2g2a–/–, bất kể điều trị bằng DMBA/TPA. Do đó, các nhà khoa học đưa ra giả thuyết rằng kiểu hình da được quan sát thấy ở chuột Pla2g2a–/– có thể phản ánh một tác động thứ cấp do một số thay đổi ở các mô khác, có thể là ở ruột, nơi sPLA2-IIA được biểu hiện dồi dào.
Mặc dù biểu hiện của sPLA2-IIA được gây ra bởi các kích thích tiền viêm như LPS ở các mô khác nhau của người, chuột và thỏ, biểu hiện của nó trong ruột của chuột BALB/c không bị ảnh hưởng sâu sắc, ngay cả sau khi điều trị bằng LPS. Do đó, các nhà nghiên cứu suy đoán rằng biểu hiện trạng thái ổn định cao của sPLA2-IIA trong ruột của chuột BALB/c có thể là do tiếp xúc cấu thành với hệ vi sinh vật cộng sinh trong lòng ruột. Để hỗ trợ giả thuyết này, biểu hiện Pla2g2a trong hồi tràng và đại tràng giảm sau khi điều trị bằng kháng sinh hoặc trong điều kiện vô trùng, cho thấy rằng một số thành phần vi sinh vật có nguồn gốc từ hệ vi sinh vật đường ruột góp phần vào biểu hiện cao và cấu thành của Pla2g2a trong ruột.
Sự thiếu hụt sPLA2-IIA làm thay đổi hệ vi sinh vật đường ruột. Xem xét hồ sơ biểu hiện của sPLA2-IIA, các nhà nghiên cứu suy đoán rằng việc thiếu sPLA2-IIA ở ruột sẽ có một số ảnh hưởng đến hệ vi sinh vật đường ruột, từ đó ảnh hưởng thứ cấp đến quá trình sinh ung thư ở da xa. Để giải quyết vấn đề này, họ đã kiểm tra hệ vi sinh vật trong phân của chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/– bằng phân tích giải trình tự gen thông lượng cao của rRNA 16S của vi khuẩn. Để loại trừ khả năng lây truyền gia đình có thể ảnh hưởng đến hệ vi sinh vật đường ruột, họ đã phân tích phân từ chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/– cùng lứa có nguồn gốc từ bố mẹ Pla2g2a+/– giống nhau và được nuôi riêng theo kiểu gen sau khi cai sữa. Phân tích đơn vị phân loại hoạt động (OTU) cho thấy khoảng 600 OTU có mặt ở cả chuột Pla2g2a–/– và Pla2g2a+/+, không có sự khác biệt rõ rệt về α-đa dạng được xác định bởi chỉ số Shannon. Sự phong phú tuyệt đối (tức là tải lượng vi sinh vật) của hệ vi sinh vật trong phân và sự phong phú tương đối của chúng ở cấp độ bộ và họ không khác biệt đáng kể giữa các kiểu gen. Tuy nhiên, ở cấp độ chi, các nhà khoa học quan sát thấy sự khác biệt đáng chú ý về sự phong phú tương đối của một số vi khuẩn giữa chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/–. Thật vậy, phân cụm phân cấp với β-đa dạng ở cấp độ chi dẫn đến sự phân tách của hệ vi sinh vật thành 2 nhóm – một nhóm bao gồm cụm Pla2g2a+/+ và nhóm còn lại bao gồm cụm Pla2g2a–/– – cho thấy rằng thành phần của hệ vi sinh vật đường ruột ở chuột Pla2g2a–/– khác với ở chuột Pla2g2a+/+. Phân tích kích thước hiệu ứng phân biệt tuyến tính (LEfSe) cho thấy rằng một số chi vi khuẩn như Lachnospiraceae và Ruminococcaceae Gram dương, cũng như Prevotellaceae và Helicobacteraceae Gram âm, được phân bố khác nhau ở chuột Pla2g2a–/– và chuột Pla2g2a+/+. Đánh giá hệ vi sinh vật đường ruột bằng phân tích phân loại rừng ngẫu nhiên cũng chứng minh rằng vi khuẩn thuộc họ Ruminococcaceae, Lachnospiraceae và Helicobacteraceae bị ảnh hưởng một cách có thể tái tạo như các biến đáng chú ý trong 2 bộ thí nghiệm độc lập. Theo báo cáo, Helicobacteraceae làm trầm trọng thêm viêm ruột và ung thư dạ dày, trong khi Lachnospiraceae và Ruminococcaceae có tác dụng ức chế viêm đại tràng bằng cách sản xuất butyrate. Những kết quả này cho thấy rằng sPLA2-IIA thực sự góp phần vào việc định hình hệ vi sinh vật đường ruột.
Hệ vi sinh vật đường ruột bị thay đổi là cơ sở cho kiểu hình da ở chuột Pla2g2a–/–. Để xác định xem hệ vi sinh vật bị thay đổi được quan sát thấy ở chuột Pla2g2a–/– có chịu trách nhiệm cho kiểu hình ung thư da hay không, các nhà nghiên cứu đã thực hiện các nghiên cứu chuyển hệ vi sinh vật bằng cách nuôi chung cả hai kiểu gen, dẫn đến trao đổi hệ vi sinh vật thông qua ăn phân. Để kết thúc vấn đề này, chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/– phù hợp về tuổi và giới tính được nuôi trong các lồng khác nhau sau khi cai sữa (nuôi chung [–]) hoặc nuôi trong cùng một lồng trong suốt cuộc đời (nuôi chung [+]). Đáng chú ý, sau khi nhận DMBA/TPA, sự phát triển khối u da thấp hơn rõ rệt ở chuột Pla2g2a−/− so với chuột Pla2g2a+/+ trong nhóm nuôi chung (–), trong khi chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a−/− được nuôi chung cho thấy khả năng nhiễm khối u thấp, tương tự như phản ứng được thấy ở chuột Pla2g2a−/− được nuôi đơn lẻ.
Để giải quyết thêm liệu nuôi chung có ảnh hưởng đến bất kỳ kiểu hình da nào khác ở chuột Pla2g2a−/− hay không, các nhà khoa học đã áp dụng mô hình vẩy nến do imiquimod gây ra (IMQ). Ứng dụng lạc chỗ của IMQ gây ra phù nề tai nghiêm trọng hơn ở chuột Pla2g2a−/− so với chuột Pla2g2a+/+ trong nhóm nuôi chung (–), trong khi chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a−/− được nuôi chung cho thấy một phản ứng tương tự. Một lần nữa, các phản ứng vẩy nến được quan sát thấy ở chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/– được nuôi chung tương tự như những phản ứng được quan sát thấy ở chuột Pla2g2a–/– được nuôi đơn lẻ. Như vậy, bất kể sự cải thiện hay làm trầm trọng thêm các mô hình bệnh tật, nuôi chung cho phép kiểu hình da ở chuột Pla2g2a+/+ tương tự như những gì thấy ở chuột Pla2g2a–/– được nuôi đơn lẻ.
Mặc dù phân tích OTU về hệ vi sinh vật trong phân từ 4 nhóm này (tức là chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a−/− có hoặc không có nuôi chung) cho thấy rằng sự đa dạng của vi khuẩn không bị ảnh hưởng bởi kiểu gen và điều kiện nuôi, phân tích tọa độ chính (PCoA) dựa trên khoảng cách phát sinh loài phân số duy nhất (UniFrac) để thăm dò mức độ tương đồng giữa các nhóm đã chứng minh sự khác biệt trong việc phân cụm chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/– được nuôi đơn lẻ, trong khi 2 kiểu gen này sau khi nuôi chung cho thấy một cụm riêng biệt và chung. Mặc dù hệ vi sinh vật trong phân ở chuột Pla2g2a–/– được nuôi đơn lẻ hình thành 2 cụm, có thể là do hiệu ứng lồng, nhưng chúng vẫn cho thấy sự phân tách rõ ràng so với những con ở chuột Pla2g2a+/+ được nuôi đơn lẻ và cả những con ở chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/– được nuôi chung. Những kết quả này ngụ ý rằng hệ vi sinh vật được chuyển từ chuột Pla2g2a–/– ảnh hưởng đến khả năng mắc bệnh ở chuột Pla2g2a+/+ (và ngược lại) trong điều kiện nuôi chung (+).
Trong số một số vi khuẩn trúng đích (ví dụ: Helicobacteraceae, Ruminococcaceae và Lachnospiraceae) được xác định bằng phân tích rừng ngẫu nhiên, một loài vi khuẩn cụ thể, Helicobacter OTU 2564048, có xu hướng cho thấy mối tương quan với kiểu hình da; mức độ của nó rất thấp ở chuột Pla2g2a+/+ được nuôi đơn lẻ, nhưng nó có mặt nhiều hơn và ngang nhau ở chuột Pla2g2a–/– được nuôi đơn lẻ và chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/– được nuôi chung. Ruminococcaceae (UCG-013 và nhóm NK4A214) và Lachnospiraceae Marvinbryantia hiển thị một xu hướng ngược lại, mặc dù mối tương quan trong nhóm nuôi chung ít rõ ràng hơn. Một tìm kiếm BLAST cho thấy Helicobacter OTU 2564048 có liên quan chặt chẽ với H. japonicus chủng MIT 01-6451 NR_149210.1 (99%), H. marmotae chủng MIT 04-8589 GU9027.1 (98%) và H. pylori chủng MKF8 AP017358.1 (96%). Sự gia tăng thuộc địa Helicobacter ở chuột Pla2g2a–/– dường như tương thích với một nghiên cứu trước đây chứng minh rằng chuột PLA2G2ATGN được bảo vệ chống lại H. felis nhiễm trùng. Mặc dù thường được coi là Helicobacter có liên quan đến viêm đường tiêu hóa và ung thư, một số bằng chứng cho thấy rằng những người dương tính với H. pylori có nguy cơ dị ứng thấp hơn so với những người âm tính với H. pylori. Mặc dù mối quan hệ nhân quả giữa sự phong phú trong phân của một Helicobacter cụ thể hoặc các loài vi khuẩn khác và kiểu hình da ở chuột Pla2g2a–/– vẫn chưa được làm sáng tỏ, nhưng kết quả của các nhà khoa học vẫn cung cấp sự hỗ trợ mạnh mẽ cho quan điểm rằng sự điều chỉnh hệ vi sinh vật đường ruột bởi sPLA2-IIA, một protein kháng khuẩn có nguồn gốc từ tế bào Paneth, có liên quan đến sự thay đổi khả năng mắc ung thư da và bệnh vẩy nến.
Biểu hiện gen ruột bị thay đổi ở chuột Pla2g2a–/–. Để hiểu rõ hơn về vai trò của sPLA2-IIA ở ruột, các nhà khoa học đã thực hiện lập hồ sơ gen microarray bằng cách sử dụng ruột non từ chuột Pla2g2a−/− và Pla2g2a+/+. Một biểu đồ phân tán dữ liệu microarray cho thấy một sự thay đổi đáng chú ý trong hồ sơ biểu hiện gen cho chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+. Các nhà nghiên cứu lưu ý rằng một nhóm gen mã hóa các vùng biến đổi trong chuỗi nặng và chuỗi nhẹ của Ig đã bị thay đổi đáng kể nhất ở chuột Pla2g2a−/− so với chuột Pla2g2a+/+. Quan sát này cho thấy rằng các phản ứng kháng thể đối với hệ vi sinh vật cộng sinh là khác biệt giữa các kiểu gen, cung cấp thêm sự hỗ trợ cho khả năng mất sPLA2-IIA ở ruột ảnh hưởng đến hệ vi sinh vật đường ruột. Hơn nữa, mức biểu hiện của một số gen liên quan đến khả năng miễn dịch, hàng rào biểu mô và chuyển hóa lipid cũng khác biệt đáng chú ý giữa các kiểu gen. Khuynh hướng tổng thể ngụ ý rằng sự thiếu hụt sPLA2-IIA cho phép ruột duy trì ở trạng thái tiền viêm nhẹ, mặc dù mô học ruột dường như bình thường ở cả hai kiểu gen. Sự gia tăng cao nhất của Il12rb2 (chuỗi β thụ thể IL-23) ở chuột Pla2g2a−/− so với chuột Pla2g2a+/+ có thể là một phản ánh của sự gia tăng khả năng miễn dịch loại Th17, có thể liên quan đến bệnh vẩy nến ở da xa. Phân tích ontology gen (GO) cho thấy sự điều hòa giảm của một số gen liên quan đến tín hiệu PPAR ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+, phù hợp với sự giảm biểu hiện của một số gen phụ thuộc PPARγ (ví dụ: Adiq, Fabp4, Lpl, Scd1 và Plin1) ở chuột null. Xem xét rằng tín hiệu PPAR làm suy yếu tình trạng viêm, sự giảm biểu hiện của một nhóm gen trong con đường tín hiệu này có thể liên quan đến sự biểu hiện tăng lên của một số gen gây viêm ở chuột Pla2g2a–/–. Cùng với điều này, chuột Pla2g2a–/– có biểu hiện thấp hơn của 2 dấu hiệu đã biết cho đại thực bào M2 (Arg1 và Cd206), sự biệt hóa của chúng phụ thuộc vào tín hiệu PPAR, mặc dù biểu hiện của các dấu hiệu đặc trưng cho các tế bào miễn dịch khác (Cd11c, Cd8, Foxp3 và Sox13 cho đại thực bào và tế bào đuôi gai M1, tế bào T gây độc tế bào, tế bào Tregs và tế bào γδ T, tương ứng) không bị ảnh hưởng sâu sắc bởi sự thiếu hụt sPLA2-IIA. Đáng chú ý, biểu hiện của Fcera1a (mã hóa chuỗi α FcεRI, một dấu hiệu tế bào mast) thấp hơn ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+, và điều này cho thấy sự rối loạn biệt hóa tế bào mast và khử hạt ở chuột Pla2g2a–/–.
Một nghiên cứu gần đây đã chỉ ra rằng biểu hiện Tg quá mức của PLA2G2A ở người ở chuột C57BL/6 điều chỉnh tiêu cực sự biệt hóa của tế bào Paneth từ tế bào gốc ruột thông qua hạn chế tín hiệu Yap-Wnt. Tuy nhiên, nghiên cứu này cho thấy rằng biểu hiện của Sox9 (một dấu hiệu tế bào Paneth) là tương tự giữa chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/–, trong khi đó Axin2 và Lgr5 (tín hiệu Wnt và dấu hiệu tế bào gốc, tương ứng) thấp hơn đáng kể ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+. Như vậy, không giống như trường hợp ở chuột PLA2G2ATGN C57BL/6, việc xóa gen sPLA2-IIA ở chuột BALB/c không làm rối loạn sâu sắc sự biệt hóa tế bào Paneth, mặc dù nó có thể có một số tác động đến hốc tế bào gốc, có thể phản ánh một tác động thứ cấp của sự thay đổi hệ vi sinh vật đường ruột.
Các chất chuyển hóa trong máu bị thay đổi ở chuột Pla2g2a–/–. Vì chứng khó tiêu đi kèm với những thay đổi trong các chất chuyển hóa vi sinh vật hoặc vật chủ ảnh hưởng đến phản ứng của vật chủ, các nhà khoa học đã thực hiện phân tích chuyển hóa toàn diện các chất ưa nước trong huyết tương của chuột Pla2g2a–/– và Pla2g2a+/+. Trong số 511 chất chuyển hóa được phân tích, khoảng 160 chất được phát hiện trong huyết tương, trong đó 19 chất chuyển hóa đã thay đổi đáng kể ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+. Các chất chuyển hóa này được phân loại thành một số nhóm, bao gồm những chất liên quan đến (a) chu trình urê, (b) các loài oxy phản ứng (ROS), (c) chuyển hóa choline, (d) các chất chuyển hóa của vi khuẩn, (e) các chất chuyển hóa khác và (f) chất chuyển hóa ung thư trong chu trình TCA.
Chu trình urê có liên quan đến khả năng miễn dịch tế bào T và thúc đẩy khối u. Một số chất chuyển hóa trong chu trình urê đã giảm đồng thời ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+. Điều này có thể liên quan một phần đến việc giảm biểu hiện của Arg1, chịu trách nhiệm tạo ra urê từ arginine. Chuột Pla2g2a–/– có mức độ thấp hơn của các chất chuyển hóa liên quan đến ROS, bao gồm α-aminoadipate, 3-indoxyl sulfate, methionine sulfoxide và axit amin chuỗi nhánh, có thể liên quan đến các phản ứng toàn thân bị thay đổi bao gồm viêm và ung thư. Mức độ choline và glycerophosphocholine (GPC) trong huyết tương, sự tích tụ bất thường của chúng thường liên quan đến sự chuyển đổi ác tính, giảm ở chuột Pla2g2a–/–. Trong đường ruột, phosphatidycholine (PC) trong chế độ ăn uống và mật được phân hủy thành GPC và sau đó thành choline bằng các tác động tuần tự của phospholipase và phosphodiesterase. Điều này làm tăng khả năng rằng, ngoài sPLA2-IB, một sPLA2 tuyến tụy, sPLA2-IIA có thể hoạt động như một sPLA2 tiêu hóa khác để phân hủy PC trong chế độ ăn uống và mật trong sự hiện diện của axit mật giống như chất tẩy rửa trong lòng ruột.
Một số chất chuyển hóa của vi khuẩn như trigonelline và ectoine, có thể điều chỉnh tình trạng viêm và ung thư, và các axit dicarboxylic như pimelate, sebacate và azelate, có mức độ liên quan đến những thay đổi trong hệ vi sinh vật đường ruột như Ruminococcaceae, giảm ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+, cung cấp thêm thông tin chi tiết về quan điểm rằng sPLA2-IIA góp phần vào việc định hình hệ vi sinh vật đường ruột. Sự giảm cytosine, 3-ureidopropionate (một sản phẩm phân hủy pyrimidine) và 3-aminoisobutyrate (một sản phẩm phân hủy thymine) ở chuột Pla2g2a–/– có thể tương quan với sự giảm các tiền chất của chúng là aspartate và valine. Tuy nhiên, sự thiếu hụt sPLA2-IIA không ảnh hưởng đến mức độ của 2-hydroxyglutarate, fumarate và succinate, loại trừ sự tham gia của các chất chuyển hóa ung thư có nguồn gốc từ chu trình TCA này. Nhìn chung, sự thiếu hụt sPLA2-IIA làm thay đổi mức độ trong máu của các chất chuyển hóa khác nhau có thể ảnh hưởng đến quá trình sinh ung thư và viêm.
Lipid phân bị thay đổi ở chuột Pla2g2a–/–. Sau đó, các nhà khoa học đã phân tích hồ sơ lipid phân của chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+ bằng phân tích lipidomics bằng cách sử dụng sắc ký lỏng kết hợp với khối phổ song song (LC-MS/MS). Một biểu diễn bản đồ nhiệt của các lipid riêng lẻ (axit béo và các chất chuyển hóa oxy hóa của chúng) được tóm tắt, và dữ liệu định lượng cho các lipid đại diện được hiển thị.
Một loại chất chuyển hóa đặc hiệu cho vi khuẩn có nguồn gốc từ axit linoleic (LA; 18:2), chẳng hạn như axit 10-oxo-octadecanoic (KetoB), axit 10-oxo-trans-11-octadecenoic (KetoC) và LA liên hợp (CLA1/3; cis-9, trans-11- và trans-9, axit octadecadienoic trans-11-), giảm đáng kể ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+. Các chất chuyển hóa LA của vi khuẩn này có khả năng làm suy yếu tình trạng viêm và cải thiện chức năng trao đổi chất và hàng rào. Một loại chất chuyển hóa axit béo khác mà hầu hết (ngay cả khi không chỉ) giảm ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+ là các este axit béo phân nhánh của axit hydroxy béo (FAHFA) bao gồm những loại có este axit béo chuỗi ngắn (axit acyl α-hydroxy béo; AAHFA), cũng như các este axit béo tuyến tính (axit O-acyl-ω-hydroxy béo; OAHFA). Thật vậy, mức độ của AAHFA, trong đó một axit béo chuỗi ngắn (acetate, propionate hoặc butyrate) được este hóa tại vị trí C-2 (α) của một axit béo chuỗi dài, thấp hơn đáng kể ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+. FAHFA chuỗi dài có chức năng chống viêm, chống oxy hóa và chống tiểu đường, có thể bằng cách tác động lên GPR40 hoặc GPR120, và AAHFA – có khả năng được sản xuất bởi hệ vi sinh vật đường ruột – có tương quan nghịch với bệnh chuyển hóa. Bởi vì OAFHA là sản phẩm phụ của quá trình sinh tổng hợp lipid hàng rào ω-O-acylceramide trong tế bào sừng, sự giảm một số loài OAFHA trong ruột của chuột Pla2g2a–/– có thể phản ánh sự nhiễu loạn của hàng rào biểu mô ruột. Mặc dù các axit béo chuỗi ngắn, được sản xuất bởi hệ vi sinh vật đường ruột thông qua quá trình lên men chất xơ trong chế độ ăn uống, có tác dụng có lợi đối với quá trình trao đổi chất và khả năng miễn dịch bằng cách tác động lên GPR41, GPR43 hoặc GPR109 hoặc bằng cách ức chế histone deacetylase HDAC, chúng không khác biệt đáng kể giữa các kiểu gen.
Ngoài ra, các oxylipin khác nhau (tức là các chất chuyển hóa oxy hóa của axit béo không bão hòa đa), bao gồm cả những chất có nguồn gốc từ LA, axit linolenic (LN; 18:3), axit arachidonic (AA; 20:4), axit eicosapentaenoic (EPA; 20:5), axit docosapentaenoic (DPA; 22:5) và axit docosahexaenoic (DHA; C22:6), có xu hướng phong phú hơn một chút ở chuột Pla2g2a–/– so với chuột Pla2g2a+/+. Hầu hết các chất chuyển hóa này là các dạng epoxy, hydroxy và dihydroxy của axit béo không bão hòa đa, có thể được sản xuất bởi lipoxygenase hoặc cytochrome P450 trong cả tế bào vi sinh vật và tế bào chủ và thường có chức năng chống viêm. Ngược lại, các prostanoid, được sản xuất bởi cyclooxygenase của vật chủ, hầu như không được phát hiện trong phân, cho thấy rằng phần lớn các chất trung gian lipid phân này có nguồn gốc từ hệ vi sinh vật đường ruột. Tóm lại, dữ liệu cho thấy rằng việc thiếu sPLA2-IIA làm thay đổi các chất chuyển hóa axit béo khác nhau có nguồn gốc từ vi khuẩn trong ruột, điều này có thể ảnh hưởng đến ung thư và viêm ở các mức độ khác nhau.
Thông tin chi tiết từ chuột Pla2g2a–/– được nuôi trong cơ sở động vật thứ hai. Trong khi chuột Pla2g2a–/– và chuột cùng lứa ban đầu được nuôi trong cơ sở động vật không có mầm bệnh cụ thể (SPF) tại TMIMS, nơi tất cả các phân tích nói trên được thực hiện, sau đó chuột được chuyển đến cơ sở động vật SPF thứ hai, nghiêm ngặt hơn tại UTokyo, nơi có tiêu chuẩn tiếp cận và thiết bị bảo vệ cá nhân nghiêm ngặt hơn. Đáng chú ý, biểu hiện Pla2g2a ở ruột ở chuột WT được nuôi trong cơ sở động vật UTokyo thấp hơn so với ở cơ sở đầu tiên, tương đương với biểu hiện được thấy ở chuột không mầm bệnh. Hơn nữa, trong cơ sở động vật UTokyo, bệnh vẩy nến do IMQ gây ra là tương đương giữa chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/–. Trên thực tế, tình trạng sưng tai và biểu hiện dấu hiệu vẩy nến ở cả hai kiểu gen tại cơ sở UTokyo tương tự như ở chuột Pla2g2a–/– được nuôi đơn lẻ và chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/– được nuôi chung tại cơ sở TMIMS. Những kết quả này chỉ ra rằng chuột được nuôi trong cơ sở UTokyo có thể thiếu các loài vi khuẩn đường ruột cụ thể góp phần vào việc điều hòa tăng biểu hiện Pla2g2a, do đó làm giảm tác dụng của sPLA2-IIA ở ruột trên da xa.
Phân tích OTU, cây phả hệ cụm và PCoA về rRNA 16S của vi khuẩn đường ruột cho thấy rằng sự phong phú, đa dạng và thành phần của hệ vi sinh vật đường ruột gần như giống hệt nhau giữa chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/– được nuôi trong cơ sở UTokyo. Tuy nhiên, một số loài Ruminococcaceae (nhóm UGC-014 và NK4A214) và Lachnospiraceae (nhóm NK4B4 và Marvinnryantia), đã bị thay đổi ở chuột Pla2g2a–/– tại cơ sở TMIMS, cũng cho thấy một xu hướng tương tự ở những người được nuôi tại cơ sở UTokyo, cho thấy rằng độ nhạy cảm của các vi khuẩn này với sPLA2-IIA được bảo tồn bất kể các điều kiện nuôi khác nhau. Đáng chú ý, Helicobacter không thể phát hiện được ở cả chuột Pla2g2a+/+ và Pla2g2a–/– được nuôi tại cơ sở UTokyo, nơi sự vắng mặt của Helicobacter được kiểm soát chặt chẽ bởi một quy tắc của cơ sở. Ngoài ra, Ruminococcaceae UCG-013, đã bị thay đổi ở chuột Pla2g2a–/– tại cơ sở TMIMS, không khác biệt đáng kể giữa các kiểu gen tại cơ sở UTokyo. Như vậy, sự giống nhau tổng thể của hệ vi sinh vật đường ruột, và có thể là do sự vắng mặt của Helicobacter hoặc không có sự khác biệt về Ruminococcaceae UCG-013 hoặc một số vi khuẩn khác, tại cơ sở UTokyo có thể làm cho chuột Pla2g2a–/– ít bị ảnh hưởng bởi kiểu hình da hơn.