Bệnh não xốp truyền nhiễm (TSE) là một bệnh thoái hóa thần kinh gây tử vong do các protein tế bào gấp khúc sai (PrP(Sc); prion) gây ra, chúng thường kháng lại các kỹ thuật bất hoạt mầm bệnh thông thường. Để đảm bảo khử nhiễm và vô hiệu hóa hiệu quả các prion có thể có trong vật liệu nguồn, chúng tôi đã nghiên cứu các yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến việc vô hiệu hóa prion bằng NaOH.
Việc giảm khả năng lây nhiễm prion tương quan với sự biến mất của lõi kháng protease của PrPSc (PrPRES) được quan sát thấy trong các xét nghiệm sinh hóa. Để mô hình hóa sự bất hoạt prion, chất đồng nhất não chuột hamster bị bệnh scrapie (chủng 263K) (SBH) đã được ủ trong khoảng thời gian cụ thể trong NaOH 0,1 m ở 4 hoặc 18 độ C, có hoặc không có chất tẩy rửa. Các mẫu trung hòa được tiêu hóa hạn chế bằng proteinase K (PK) và sau đó được phân tích bằng xét nghiệm western blot pha loãng điểm cuối và kháng thể 3F4. Những thay đổi cấu trúc trong prion tiếp xúc với NaOH đã được kiểm tra bằng cách sử dụng kết tủa miễn dịch khác biệt.
Xử lý SBH bằng NaOH 0,1 m trong 15 phút, không có chất tẩy rửa, ở 4 và 18 độ C làm giảm tín hiệu PrP(RES) tương ứng là 3,5 và 4,0 log10 đơn vị, với một số tín hiệu dư còn lại. Sự hiện diện của chất tẩy rửa sarkosyl trong quá trình ủ 60 phút trong NaOH tiếp tục tăng cường giảm PrPRES xuống > hoặc = 4,5 log10 đơn vị (tức là dưới giới hạn phát hiện).
Xử lý NaOH gây ra những thay đổi về cấu trúc trong PrP dẫn đến sự lộ ra của một epitope ẩn và cho phép kết tủa miễn dịch prion bằng kháng thể 3F4.
Việc sử dụng NaOH có thể làm giảm hiệu quả mức độ prion trong một thử nghiệm bất hoạt in vitro. Sau khi xử lý trước SBH bằng chất tẩy rửa, NaOH loại bỏ hoàn toàn tín hiệu PrPRES. Chất tẩy rửa có thể giải phóng PrPSc được bảo vệ bằng màng lipid để cải thiện khả năng tiếp cận NaOH, sau đó có thể bất hoạt PrPSc bằng cách thay đổi cấu trúc của nó.
Trong trường hợp tiếp xúc không xác định với PrPSc trong quá trình sản xuất, các quy trình vệ sinh kết hợp việc sử dụng chất tẩy rửa và NaOH có thể giúp đảm bảo mức độ ô nhiễm tối thiểu trong các sản phẩm. NaOH, kết hợp với các chất tẩy rửa phù hợp, là một công cụ mạnh mẽ trong việc ngăn ngừa sự lây lan của prion và bảo vệ sức khỏe cộng đồng.
